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   大花蕙兰组织培养工厂化生产技术(转载,不代表本站认同)




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    大花蕙兰,技术 一、启动诱导(一)母株的选择。母株的选择应遵循三项基本原则:1.整个群体表现出该品种的典型性状;2.群体生长发育良好,没有普遍发生特定病害浸染,特别是东亚兰花叶病毒,齿舌兰轮斑病毒;3.在符合上述条件的群体中选择性状优异的健壮单株作母株。(二)外植体处理。选择叶片未完全展开的肥壮营养芽(勿选花芽)为外植体,先剥去2~3片外层叶片,再手持兰花叶芽梢,切去基部胜物及损伤、老化组织,最后逐层剥净外层叶片,直至有小顶芽和小侧芽露出。然后在超净工作台上先用70%的酒精浸泡外植体30秒,用无菌水冲洗后,再放入0.1%的氯化汞溶液中浸泡8分钟左右,再用无菌水冲洗3~4次,然后在无菌接种盘上小心切下顶芽和侧芽。(三)圆球茎诱导与驯化。将切下的顶芽和侧芽插入诱导培养基中,基部向下,稍稍露出芽尖。然后将其置于培养室中进行培养,光照强度1000~1500勒克斯,光照时间每天14小时,培养温度25℃左右。10天后芽开始萌动,诱导率在85%以上。在圆球茎的诱导过程中,有80% 左右的芽萌发后很容易长成小苗。诱导30天后,待小苗长至4厘米、基部膨大时,将苗切离基部,并将膨大基部纵切成厚3~4毫米的薄片,切口向下重新放入相同的新鲜培养基中,30~35天从下端切口部位可长出类似愈伤组织的圆球茎,其中顶芽诱导率最高,诱导速度也最快,侧芽次之。

  二、继代增殖和幼苗分化将圆球茎接种于继代培养基中,然后将其置于培养室中培养,培养温度25℃左右,光照强度3000勒克斯,光照时间每天10小时。每 45~50天继代一次,增殖倍数可在10倍以上。继代增殖初期用浓度为1.5×10-6至2×10-6的6-BA(植物生长调节剂)可以较快地积累材料,随着继代次数的增加,特别是15代以后或变异株开始出现后,只能用浓度为0.5×10-6至1.5×10-6的6-BA(植物生长调节剂),并在生产中及时淘汰变异的圆球茎。变异的圆球茎表面只是光滑一片,没有芽尖,不能分化出芽苗。当圆球茎继代到所需数量时,直接将完整的圆球茎转移到新鲜的增殖培养基中,不要纵切分割,也不要切除芽尖,让圆球茎表面的芽尖直接分化萌发为小苗。

  三、生根与炼苗当苗长至3厘米高、有2~3片叶时,即可将苗小心切离基部,转入壮苗生根培养基中,然后将其置于培养室中培养,培养温度25℃~28℃,光照强度5000~6000勒克斯,光照时间每天12小时,20天左右开始生根,35天可进行炼苗。大花蕙兰瓶苗移栽前先移入遮阳棚内,在自然散射光下(7000~8000勒克斯),光照时间每天8~12小时的环境中放置15~20天,可明显提高瓶苗的质量和栽植成活率。当瓶苗叶色浓绿、叶片坚挺、植株健壮时,即可出瓶移栽。.


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